中科白癜风医院爱心公益 https://m-mip.39.net/baidianfeng/mipso_6169886.html高架零迷宫(Elevatedzeromaze,EZM)是啮齿类动物EPM焦虑模型的改良版本。EZM也基于接近—回避冲突。Shepherd及其同事在年发表的论文中首次描述了EZM,并利用苯二氮卓类药物验证了EZM的效用。EZM在设计和程序上都进行了相应的修改,旨在通过增加对药物作用的敏感性和促进对药物作用的解释来改进传统EPM模型。新设计是一个高架环形平台,该平台具有两个相对的封闭象限和两个开放象限,消除了传统EPM设计中对在中央区花费时间的数据的模糊解释。
迷宫包括一个无味塑料的或者玻璃的环形平台,高出地面一定高度,平均分成四个象限。两个相对的封闭象限在平台的内外边缘被高墙包围,而其余两个相对的开放象限仅被一个边沿(约1厘米高)包围,作为动物在这些开放区域的触觉指导。该装置由弱的白光照明,为开放和封闭象限中提供类似的光照强度水平(40-60lux)。一个安装在顶部的摄像机,连接在一个单独的观察室的视频设备上,记录迷宫上的行为。视频跟踪处理软件如VisuTrack(上海欣软),可以帮助实时评分、跟踪和记录对象及其在迷宫内的运动。
EZM实验仪器也区分大小鼠,尺寸不一样。通常情况下:
1、大鼠:环形平台直径-厘米(常选厘米),轨道宽10厘米,封闭象限壁高约30厘米,距离地面50-70厘米。
2、小鼠:环形平台直径50-60厘米,轨道宽5厘米,封闭象限壁高约20厘米。距离地面40-50厘米。
EZM实验程序
1)在实验前一个星期,每天抚摸实验动物2-3分钟,借以消除实验动物对实验者的恐惧及应激。
2)实验动物提前运送到行为学测试室专用临时笼位,适应环境大约1小时,以减少动物的紧张应激。
3)使用EZM前确保设备的清洁和干燥,视频跟踪系统软硬件调试好备用。在测试前,使用专用实验记录本,填写实验动物的编号、日期、实验处理因素等。
4)将实验动物(大鼠或小鼠)从笼子中取出,但受试者放置的位置还没有统一的标准,有研究将实验动物放在一个封闭的象限上,也有放在开放象限的,还有放置在零迷宫中在开放和封闭象限之间的交界处,面向封闭区域的。无论放在哪里,保持每一只动物放置的位置和方向一致很重要。
5)当动物被放置在迷宫中后,立即启动视频跟踪系统,跟踪5分钟实验动物在EZM内的轨迹活动,视频跟踪系统将自动记录啮齿动物进入开放象限和封闭象限的次数,以及在开放象限和封闭象限的停留时间。为避免视频跟踪系统故障,或因对比度变化而记录不准确,实验者可以使用计数器和计时器同时记录以上关键数据。
6)在5分钟的测试结束后,将啮齿类动物从迷宫中取出,并放入饲养笼。
7)在测试下一只实验动物之前,一定要清除上一只动物在迷宫内遗留下来的尿液、粪便等,再用最常用的酒精清洁高架迷宫以去除气味,并用纸巾擦干,创造一个清洁、无味道的理想试验环境。
8)EZM实验也测试5分钟。这是基于Montgomery的早期研究,该研究表明,大鼠在高架开臂的前5分钟表现出最强烈的回避反应。
4.EZM评价指标
行为测量主要包括实验动物的开放象限停留时间百分比,开放象限进入次数百分比。此外,当动物位于开放象限或封闭象限的末端时,从平台边缘低头向下探索的次数,以及从封闭象限到开放象限时拉伸注意姿势的次数(定义为受试者在封闭象限表现出拉长的身体姿势,至少鼻子通过封闭-开放的分界线)。当四只爪子都在一个开放的象限时,动物被认为是在开放的区域,只有当四只爪子都经过开放-封闭的分界线时,动物才被认为是在封闭的区域。
详细的行为分析确定了与风险评估相关的测量在统计上的显著变化,特别是平台边缘的低头向下探索行为和伸展注意姿势。因此,对“零迷宫”的行为分析包含了低头向下探索和伸展注意姿势的频率。经过研究证实了在迷宫的特定位置,即当动物从封闭的象限接近开放的象限时,拉伸注意姿势的频率提供了最敏感的情绪变化指数。伸展注意的行为因素最初是在社会互动的背景下描述的,并被归类为反映接近-回避倾向的矛盾因素,现在有大量的实证证据支持这样一种观点,即伸展注意姿势的减少与焦虑的减少是一致的。重要的是,目前,在比显著影响开放象限活动更低的剂量下,抗焦虑和致焦虑药对低头向下探索和拉伸注意姿势的影响仍很普遍且明显。使用更详细的行为分析似乎增加了零迷宫对苯二氮卓类药物抗焦虑活性的敏感性。
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